組み換えタンパク質発現サービス

E.coli無細胞発現システム—SLC7A11タンパク質, ヒト（多重膜貫通タンパク質）

チャレンジ： 多重膜貫通タンパク質は高い疎水性、低い発現レベル、および高い精製難易度を持っており、可溶性タンパク質を得ることが困難です。

準備プロセス： タンパク質合成は、DNAテンプレート、ATP、アミノ酸、さまざまな基質、およびin vitroでの細胞抽出物からの酵素を追加することによって達成されます。標的タンパク質は、異なる洗剤をスクリーニングすることによって抽出されます。これまでのところ、Brij78、FOS12、およびDDMは、膜タンパク質を溶解および精製し、溶液中で正しい自然構造を形成するのに効果的な洗剤であることが判明しています。

Target protein purification profile and QC gel

Activity validation

哺乳類発現システム—ALPIタンパク質, ヒト（糖鎖修飾）

利点：哺乳類システムは複雑なPTM（糖鎖修飾など）を持っています。分子構造、物理的および化学的特性、生物学的機能に関して、哺乳類細胞で発現されるタンパク質は天然タンパク質に最も近いものです。

準備プロセス：標的タンパク質の配列に基づいて、まれなコドンやコドンの好みなどの要素を分析して最適化し、完全な遺伝子合成を行います。配列が正しいことを確認した後、遺伝子は特殊な高発現ベクターにクローン化されます。プラスミドがトランスフェクションの要件を満たしていることを確認した後、適切なトランスフェクション方法と宿主細胞を選択します。トランスフェクションが完了したら、タンパク質を精製するために、高度な機器を使用して適切な精製方法を選択します。

Target protein purification profile and QC gel

Activity validation

昆虫発現システム—POLQタンパク質, ヒト（988アミノ酸, 高分子量タンパク質）

チャレンジ：高分子量タンパク質は分泌が難しく、発現レベルが低く、精製が難しいです。

準備プロセス: 標的タンパク質の配列に基づいてコドンを最適化し、ターゲット遺伝子を合成し、適切なバキュロウイルスベクターにサブクローンして昆虫細胞にトランスフェクションします。PO世代を取得します。その後、タンパク質発現レベルを電気泳動で決定します。必要に応じて、PO世代で細胞に感染させ、P1-P2世代を生成します。P1またはP2世代で昆虫細胞に感染させた後、アフィニティ、イオン交換、疎水性相互作用、サイズ排除などのさまざまなクロマトグラフィー方法を使用して標的タンパク質を精製します。

MW: 103.1 kDa

Target protein QC gel